DNA Technology：練習題

สิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม (Genetically Modified Organisms: GMOs) ชนิด Bt-corn ได้รับการถ่ายยีนจากสิ่งมีชีวิตใด และมีประโยชน์หลักทางด้านใด

ในการสร้าง Genomic DNA library กับ cDNA library ของสิ่งมีชีวิตยูแคริโอต ข้อใดเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างคลังยีนทั้งสองชนิดได้ถูกต้อง

เอนไซม์ตัดจำเพาะ Sau3AI มีลำดับจดจำคือ \(5'\text{-}^{\downarrow}\text{GATC-}3'\) (ตัดให้ปลายเหนียว \(5'\text{-GATC}\)) และเอนไซม์ BamHI มีลำดับจดจำคือ \(5'\text{-G}^{\downarrow}\text{GATCC-}3'\) (ตัดให้ปลายเหนียว \(5'\text{-GATC}\))
หากตัดชิ้นส่วน Insert ด้วย Sau3AI แล้วนำไปเชื่อมต่อเข้ากับ Plasmid vector ที่ตัดด้วย BamHI ข้อใดกล่าวถึงรอยต่อที่เกิดขึ้นหลังการเชื่อมต่อด้วย DNA ligase ได้ถูกต้องที่สุด

ยีนต้านทานยาปฏิชีวนะ (Antibiotic resistance gene) เช่น ยีนต้านยาแอมพิซิลลิน ( ext{amp}^R) ที่บรรจุอยู่ในพลาสมิดเวกเตอร์ มีประโยชน์หลักในกระบวนการโคลนยีนอย่างไร

พลาสมิดวงกลมขนาด \(8\text{ kb}\) ชนิดหนึ่ง มีตำแหน่งตัดจำเพาะของเอนไซม์ BamHI เพียง 1 ตำแหน่ง และไม่มีตำแหน่งตัดของเอนไซม์ EcoRI
หากนำชิ้นส่วน DNA แปลกปลอมแบบเส้นตรง (Linear DNA) ขนาด \(3\text{ kb}\) ซึ่งมีตำแหน่งตัดของ BamHI อยู่ที่ปลายทั้งสองข้าง และมีตำแหน่งตัดของ EcoRI อยู่กึ่งกลางชิ้นส่วนพอดี (ห่างจากปลายแต่ละด้าน \(1.5\text{ kb}\)) มาตัดต่อเข้ากับพลาสมิดดังกล่าวจนได้เป็น Recombinant plasmid รูปวงกลมที่สมบูรณ์
เมื่อนำ Recombinant plasmid นี้ไปตัดด้วยเอนไซม์ EcoRI เพียงชนิดเดียว จนสมบูรณ์ จะได้ชิ้นส่วน DNA ขนาดเท่าใดและมีจำนวนกี่ชิ้น

ในเทคโนโลยีทางดีเอ็นเอ การใช้เทคนิค Polymerase Chain Reaction (PCR) จำเป็นต้องใช้เอนไซม์ชนิดใดที่มีสมบัติพิเศษในการทนความร้อนสูง และเอนไซม์นี้มีบทบาทหน้าที่อย่างไรในกระบวนการดังกล่าว

ในระบบ CRISPR-Cas9 สำหรับการตัดแต่งพันธุกรรม เอนไซม์ Cas9 จะทำหน้าที่ตัดสาย DNA เป้าหมายโดยอาศัยโมเลกุลใดเป็นตัวนำทาง และหากต้องการให้เกิดการซ่อมแซม DNA แบบเฉพาะเจาะจงเพื่อแทรกยีนใหม่เข้าไป จะต้องอาศัยแม่แบบ DNA สายสั้นหรือสายยาวที่มีลักษณะอย่างไรเข้ามาช่วยในกระบวนการ Homology-directed repair (HDR)